【肿瘤标志物科普系列报道十九】专家科普-《癌症知多少-肿瘤标志物》

发布时间:Feb 21, 2020 7:44:55 PM更新时间:Feb 21, 2020 7:44:55 PM

内容引自中国抗癌协会科普系列图书之《癌症知多少-肿瘤标志物》,本章编委为郑华川、刘冬妍、卢仁泉、佘彬四位教授,如有侵权请联系我们立即删除。

问:肿瘤诊断标志物检测为什么各个医院价格差别很大?

答:肿瘤标志物检测的项目很多,检测手段也很多;同一种标志物,不同的医院可选取不同的检测方法进行测定,而检测手段、平台的不同直接导致了收费标准的变化。在患者眼中的“同一个项目”,在不同医院可能是完全不同的检测技术或是技术组合,如有生化测定、酶免测定、发光测定等;也就是说,你在不同医院做的“患者眼中的同一个项目”,实际得到的医疗服务可能是不同的,这个不同体现在:检查中用的试剂不一样、检查使用的设备不一样、设备使用的参数不一样等等,自然价格差就比较大。一般来讲,等级越高的医院,使用的设备更规模化、更自动化。因此,不同的医院的检测机器、型号不同、检测试剂也不同,这也导致了各医院对肿瘤标志物的收费差别较大。


问:基于数字PCR平台的液体检测的标志物开发意义?

答:数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于定量PCR(qPCR),数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。这两种基因检测技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。

数字PCR( digital PCR,dPCR) 的原理是通过将一个样本分成几十到几万份,分配到不同的反应单元,每个单元至少包含一个拷贝的目标分子(DNA 模板),在每个反应单元中分别对目标分子进行PCR 扩增,扩增结束后对各个反应单元的荧光信号进行有和无统计学分析,这就是直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量

液体活检技术飞速发展,利用血浆游离DNA(cell free DNA,cfDNA)检测肿瘤相关分子标志物具有显著优势,尤其适用于较难通过手术或穿刺获得肿瘤组织样本的患者,并在一定程度上克服肿瘤异质性。 例如局部晚期或转移性非小细胞性肺癌(NSCLC)成人患者肺癌治疗采用靶向药物表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗时或治疗后出现疾病进展,这时可通过对患者血浆游离DNA检测确认其是否存在EGFR T790M突变,如果突变阳性可使用第三代肺癌靶向药物泰瑞沙(甲磺酸奥希替尼片,AZD9291)。这时采用最新的数字PCR检测血浆cfDNA中EGFR T790M突变,检测灵敏度较qPCR更高,并可检测突变丰度(突变拷贝数),预测用药的疗效。突变丰度越高靶向治疗效果可能会越好,这也是符合逻辑的,因为携带EGFR T790M突变的癌细胞比例更高,靶向药物作用的癌细胞越多。

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